qPCR熒光定量PCR儀,由熒光定量系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)組成,用來(lái)監(jiān)測(cè)循環(huán)過(guò)程的熒光。與實(shí)時(shí)設(shè)備相連的計(jì)算機(jī)收集熒光數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)通過(guò)開發(fā)的實(shí)時(shí)分析軟件以圖表的形式顯示。原始數(shù)據(jù)被繪制成熒光強(qiáng)度相對(duì)于循環(huán)數(shù)的圖表。原始數(shù)據(jù)收集后可以開始分析。實(shí)時(shí)設(shè)備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行正常化處理來(lái)彌補(bǔ)背景熒光的差異。正常化后可以設(shè)定域值水平,這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平。
樣品到達(dá)域值水平所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)稱為Ct值(限制點(diǎn)的循環(huán)數(shù))。域值應(yīng)設(shè)定在使指數(shù)期的擴(kuò)增效率為大,這樣可以獲得準(zhǔn)確,可重復(fù)性的數(shù)據(jù)。如果同時(shí)擴(kuò)增的還有標(biāo)有相應(yīng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,線性回歸分析將產(chǎn)生一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,可以用來(lái)計(jì)算未知樣品的濃度。
qPCR熒光定量PCR儀的功能:
1、該儀器采用6組反應(yīng)模塊,每組模塊可以獨(dú)立控溫,相鄰兩個(gè)模塊的大設(shè)置溫差達(dá)5℃;可獨(dú)立設(shè)置不同的退火溫度;
2、每組反應(yīng)模塊可以獨(dú)立完成16個(gè)PCR反應(yīng),一次PCR中可使用6對(duì)不同的引物,相當(dāng)于分別在6個(gè)Blocks上進(jìn)行PCR擴(kuò)增;
3、qPCR熒光定量PCR儀具有USB記憶棒插槽,用于轉(zhuǎn)移程序,存儲(chǔ)不限數(shù)量的程序;
4、熱蓋設(shè)計(jì):熱蓋溫度可調(diào),無(wú)需加石蠟油;
5、顯示屏:6.5英寸VGA彩色觸摸式顯示屏,大的導(dǎo)航按鈕設(shè)置參數(shù)簡(jiǎn)單方便,無(wú)須使用觸摸屏筆或鼠標(biāo);
6、以太網(wǎng)聯(lián)結(jié),可同時(shí)聯(lián)結(jié)11臺(tái)同類型PCR儀進(jìn)行同一反應(yīng);
7、軟件:可執(zhí)行Touchdown及套式PCR程序,主機(jī)自帶Tm值計(jì)算軟件,可自動(dòng)計(jì)算引物解鏈溫度;
8、有多種診斷程序以檢測(cè)儀器升降溫速度和升降溫精度,以便對(duì)儀器進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)診斷。
9、自動(dòng)再啟動(dòng)功能可使斷電后恢復(fù)供電時(shí)PCR程序自動(dòng)繼續(xù)執(zhí)行,無(wú)需再重新進(jìn)行程序設(shè)定
10、具有斷電自動(dòng)保護(hù)功能,斷電后程序可以自動(dòng)保存。