熒光定量PCR儀是由熒光定量系統(tǒng)和計算機(jī)組成,用來監(jiān)測循環(huán)過程的熒光的產(chǎn)品,與實時設(shè)備相連的計算機(jī)收集熒光數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)通過開發(fā)的實時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數(shù)據(jù)被繪制成熒光強(qiáng)度相對于循環(huán)數(shù)的圖表。
原始數(shù)據(jù)收集后可以開始分析。實時設(shè)備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行正常化處理來彌補(bǔ)背景熒光的差異。正常化后可以設(shè)定域值水平,這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平。
為保證熒光定量PCR儀的有效運行、控制系統(tǒng)誤差、減少偶然誤差,使結(jié)果準(zhǔn)確、可靠,使用過程中請檢驗實驗室工作人員仔細(xì)閱讀。
儀器的保養(yǎng)及維護(hù):
1、儀器表面清潔,儀器的表面應(yīng)定期用軟布加少量清水擦洗,清洗后將儀器擦干。若有試劑泄漏在儀器表面,應(yīng)用軟布加70%酒精擦拭干凈。
2、反應(yīng)孔清潔,反應(yīng)孔沾染灰塵或雜質(zhì)后,會影響PCR擴(kuò)增和熒光檢測,因此要定期清潔,一般3個月一次,可用吹氣球輕輕吹拭。為了防止灰塵進(jìn)入反應(yīng)孔,儀器不使用時,必須關(guān)閉滑蓋。
清潔熒光定量PCR儀前必須關(guān)閉電源,并拔掉電源線。不要將液體傾倒在反應(yīng)模塊中或者儀器內(nèi)部。不能用強(qiáng)腐蝕性溶劑或者有機(jī)溶劑擦洗儀器。
3、保護(hù)儀器
不要頻繁開關(guān)儀器,兩次開關(guān)間隔時間不得低于30秒。實驗結(jié)束后不要立即關(guān)閉電源,保持待機(jī)狀態(tài)10分鐘后(此時儀器內(nèi)部風(fēng)扇仍在持續(xù)工作),待模塊溫度降至室溫再關(guān)閉電源。
4、過熱保護(hù)
熒光定量PCR儀的加熱系統(tǒng)設(shè)有過熱保護(hù)裝置,當(dāng)加熱系統(tǒng)發(fā)生故障,溫度值超過允許范圍的上*,保護(hù)裝置會自動斷開,并不可恢復(fù);此時,加熱系統(tǒng)無法繼續(xù)正常升降溫。