超微量紫外分光光度計(jì)已成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。儀器對于一般的分光光度法,其濃度測量的相對誤差在1~3%范圍內(nèi),如采用示差分光光度法進(jìn)行測量,則誤差可減少到0.1%。
什么是光度重復(fù)性?
儀器冷態(tài)開機(jī),預(yù)熱0.5h后,對標(biāo)準(zhǔn)樣品或使用者自選的樣品進(jìn)行光譜掃描,而后在譜圖上選擇幾個特征吸收峰,檢查在選定的測量次數(shù)內(nèi),各個峰值的之差即為光度重復(fù)性。
影響光度重復(fù)性的主要因素
影響超微量紫外分光光度計(jì)光度重復(fù)性的主要因素有以下幾種。
1、光源系統(tǒng)
光源系統(tǒng)即指燈泡和電源,如果氘燈或鎢燈燈泡本身的質(zhì)量不好,即使電源很好,氘燈或鎢燈發(fā)出的光通量肯定不穩(wěn)。這樣,分光光度計(jì)就不可能得到好的、穩(wěn)定的測試結(jié)果。如果氘燈或鎢燈的燈泡很好,但其電源不穩(wěn),那么光源系統(tǒng)(燈泡)發(fā)出的光通量也不可能穩(wěn),也不可能得到好的光度重復(fù)性。
2、光電轉(zhuǎn)換器系統(tǒng)
光電轉(zhuǎn)換器系統(tǒng)包括光電轉(zhuǎn)換元件及其供電電源,光電轉(zhuǎn)換元件是將光信號轉(zhuǎn)換成電信號的關(guān)鍵元件。不管分光光度計(jì)的其他元部件多好,如果光電轉(zhuǎn)換元件不好,就不可能得到好的光度重復(fù)性。
3、如果光電轉(zhuǎn)換元件很好,其供電電源不好,電源一直在波動或漂移,也不可能得到好的光度重復(fù)性。因此,超微量紫外分光光度計(jì)的制造者和使用者一定要高度重視光電轉(zhuǎn)換器系統(tǒng)對光度重復(fù)性的影響。